タカラバイオでは汎用製品から他にはないユニークな製品など、数多くの製品を取り扱っています。
さらに、皆さまの研究にお役にたつ製品と実験のコツをご紹介しています。今回はリアルタイムPCRに関する製品をご紹介します。
リアルタイムPCR法とは、PCRによるDNA増幅をリアルタイムでモニターし鋳型DNA量を解析する方法であり、電気泳動が不要なため迅速性と定量性に優れています。リアルタイムPCRのインターカレーター法のためのキットが複数あり、「自分の実験にどれを選んでいいのかわからない。」という質問が多く寄せられます。PCRの増幅効率と特異的増幅は一般的に反比例する傾向があり、どちらかに偏ったキットではリアルタイムPCRの成功率が下がります。増幅効率重視に偏ったキットでは、増幅がより早く検出できる(Ct値が小さい)ため、一見良いと思われがちですが、非特異的な増幅が起こりやすくなります。特異性重視に偏ったキットでは、逆に増幅効率が低くなる場合があります。
タカラバイオでは、増幅効率と特異性のバランスが適切でリアルタイムPCRの成功率が高いTB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (製品コード RR820A)を販売していますので、まずはこのキットでお試しください。
その他、PCR増幅長が長かったり、増幅しにくい場合は、増幅効率を重視した TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (製品コード RR420A)、手ごわいプライマーダイマーや非特異的増幅が解消しない場合は、特異性を重視したTB Green Premix DimerEraser (Perfect Real Time) (製品コード RR091A)など使いわけいただくことでさらにさまざまなケースに対応可能です。
■TB Green Premixシリーズの使い分けについて
■リアルタイムPCR用プライマー合成(インターカレーター法)
さらに、皆さまの研究にお役にたつ製品と実験のコツをご紹介しています。今回はリアルタイムPCRに関する製品をご紹介します。
リアルタイムPCR法とは、PCRによるDNA増幅をリアルタイムでモニターし鋳型DNA量を解析する方法であり、電気泳動が不要なため迅速性と定量性に優れています。リアルタイムPCRのインターカレーター法のためのキットが複数あり、「自分の実験にどれを選んでいいのかわからない。」という質問が多く寄せられます。PCRの増幅効率と特異的増幅は一般的に反比例する傾向があり、どちらかに偏ったキットではリアルタイムPCRの成功率が下がります。増幅効率重視に偏ったキットでは、増幅がより早く検出できる(Ct値が小さい)ため、一見良いと思われがちですが、非特異的な増幅が起こりやすくなります。特異性重視に偏ったキットでは、逆に増幅効率が低くなる場合があります。
タカラバイオでは、増幅効率と特異性のバランスが適切でリアルタイムPCRの成功率が高いTB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (製品コード RR820A)を販売していますので、まずはこのキットでお試しください。
その他、PCR増幅長が長かったり、増幅しにくい場合は、増幅効率を重視した TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (製品コード RR420A)、手ごわいプライマーダイマーや非特異的増幅が解消しない場合は、特異性を重視したTB Green Premix DimerEraser (Perfect Real Time) (製品コード RR091A)など使いわけいただくことでさらにさまざまなケースに対応可能です。
■TB Green Premixシリーズの使い分けについて
■リアルタイムPCR用プライマー合成(インターカレーター法)
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